MTT测定细胞代谢活力
细胞代谢活力是细胞在某一生长时期内的代谢结果，其能够反映细胞是否处于活跃状态。MTT（3-(4,5-二甲基-2-咪唑基) -2,5-二苯基四氮唑）是一种无色的季铵盐，它被生物学家广泛应用于细胞代谢活力的评估中。MTT测定细胞代谢活力已经成为现代生物学中极为重要的实验方法之一。
MTT的作用机理
MTT可以通过还原作用转化为紫色的结晶体，这个反应基于细胞线粒体内存在的还原酶能力。线粒体是维持细胞代谢活力的重要器官，MTT的还原过程即反映细胞代谢活力的程度。此外，由于绒毛膜促性腺激素浓度较低，额叶皮质激素的清除速率较缓慢，MTT的还原能力也很强，因此可以用于测定女性生殖系统疾病以及肺癌等代谢异常疾病中成纤维细胞的代谢活力。
MTT测定细胞代谢活力的步骤
MTT测定细胞代谢活力主要分为以下步骤：
- 将细胞移植到96孔板中，按细胞数量计算细胞悬液体积，并将其加入到每个孔中，每孔应添加100uL的细胞悬液
- 将96孔板培养液去除，加入100uL MTT溶液覆盖在每一个孔上，然后在黑暗环境中孵育4小时
- 将溶液去除，加入100uL DMSO（二甲基亚砜）在每个孔中，以便将MTT还原成可溶性产物，同时产生暗紫色溶液
- 在洗涤5次后，使用ELISA或高通量筛选仪可以通过颜色密度计来测定MTT溶液的吸光度。吸光度与细胞代谢活力有关，活跃的细胞在MTT显示板中的吸光度较高，反之则较低。
MTT测定细胞代谢活力的应用领域
MTT测定细胞代谢活力虽然看起来步骤麻烦，但它在现代医学中的应用广泛，可以用来研究和评估细胞的代谢状态和分类，或用于药理学研究。MTT测定细胞代谢活力还可以用于衡量激素诱导或质子泵抑制剂对细胞代谢活力的影响，因此有助于筛查出具有优异药物潜力的化合物。除此之外，MTT测定细胞代谢活力在肿瘤学研究中也被广泛应用，可以帮助我们更好地理解肿瘤细胞的生化特性，评估肿瘤预后以及筛选出能够有效抑制肿瘤细胞代谢活力的化学药物。
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